کیت 500 تست MTT Assay Kit – MTT
کیت 500 تست MTT Assay Kit) MTT)، یک کیت رنگ سنجی حساس برای اندازه گیری میزان تکثیر سلول ها است که بر مبنای احیای رنگ تترازولیومMTT کار می کند.
احیایMTT فورمازان رنگی غیر محلول عمدتا به دلیل فعالیت گلیکولیتیک در داخل سلول است و به حضور NADH و NADPH وابسته است (بنابراین با فعالیت متابولیک میتوکندری ارتباط دارد)
در سلول های بطور فعال تکثیرشونده، افزایش تبدیلMTT از طریق اسپکتروفوتومتر اندازه گیری می شود.
مقایسه این مقدار با مقدار بدست آمده از یک کنترل فاقد تیمار، باعث افزایش نسبی تکثیر سلولی می شود که ناشی از فاکتورهای تروفیک، مهارکننده های رشد، یا القا کننده ها /مهارکننده های آپوپتوزیس بوده و قابل اندازه گیری است. بطور معکوس، در سلول هایی که دچار آپوپتوزیس می شوند، احیای MTT کاهش می یابد که بیانگر مرگ سلولی است.
آماده سازی محلول کیت 500 تست MTT Assay Kit) MTT)
- با افزودن 5 میلی لیتر از محیط RPMI1640 (موجود در کیت) به ویال 25 میلی گرمی پودر MTT، محلول استوک MTT دوازده میلی مولار بسازید.
- با ورتکس یا سونیکاسیون مخلوط کنید تا حل شود.
- پارتیکل ها را از طریق فیلتراسیون یا سانتریفوژ حذف کنید.
- از محلول آماده شده به میزان برابر در 5 ویال امبر تقسیم کنید.
- هر ویالMTT معرف لازم برای 100 تست را دارد (10 لاندا از محلول استوک برای هر چاهک).
- پس از تهیه، محلول کاری MTT را می توان برای 4 هفته در 4 درجه سانتیگراد و دور از نور نگهداری کرد. مابقی استوک ها را در -20 درجه نگهداری کنید.
2,300,000 تومان
برند: Bioidea
کد کالا:
وضعیت موجودی: موجود
ویژگی های محصول
محتویات کیت
پودرMTT: یک ویال حاوی 25 میلی گرم پودر MTT
حلال: یک بطری حاوی 30 میلی لیتر محلول DMSO
فیلترسرنگی: 1 عدد
میکروتیوب امبر: 5 عدد
محیط RPMI 1640: صد میلی لیتر محلول آماده مصرف
رنگ آمیزی MTT
10 لاندا محلول استوک MTT به هر چاهک اضافه کنید.
پلیت را 4-2 ساعت در 37 درجه انکوبه کنید. با استفاده از یک میکروسکوپ، بصورت مداوم سلول ها را برای بروز نقاط رسوب داخل سلولی بررسی کنید. برخی از انواع سلول ها به زمان بیشتری حتی تا 24 ساعت نیاز دارند.
با مشاهده رسوب واضح ارغوانی زیر میکروسکوپ، 100 میکرولیتر معرف دترجنت (DMSO) به هر چاهک از جمله چاهک کنترل اضافه کنید. نیاز به برداشتن MTT یا محیط قبل از افزودن حلال نیست. به هیج وجه تکان ندهید (شیکینگ نکنید).
پلیت را با کاور بپوشانید و برای دست کم 2 ساعت تا یک شبانه روز در 24-18 درجه سانتیگراد قرار دهید. می تواند جذب نمونه ها را پس از 2 ساعت قرائت کرد اما اگر جذب پایین بود و هنوز کریستال باقی مانده بود پلیت را به تاریکی برگردانده و برای مدت بیشتری انکوبه کنید. انکوباسیون در دمای اتاق (24-18 درجه) کافی است اما انکوباسیون در دمای 37 درجه زمان حل شدن را کاهش می دهد.
محصولات مکمل
محصول مکملی جهت محصول بالا تعریف نشده است.
پرفروشترین محصولات
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.